




广州联方实验器材有限公司成立于2005年,位于广州番禺区,是集技术和销售于一体的企业。联方的创始人在美国纽约留学,归国创立了联方。中西结合的管理理念,自强不息、开拓进取、勤勉---,致力于把联方打造成一个---、一个z---一站式实验室采购平台,追求、追求服务、追求和---。科学化、精细化、化。
液相色谱柱使用问题解析
1对于一根常用的c18柱,拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护?为什么要这样做?
答:新柱活化,实际上是一个平衡的过程,除了用流动相平衡外,有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡,---是测定分子量比较高的多肽,尤其重要。因为分子量高的物质分子,扩散速度慢,平衡所需时间也相应较长。具体平衡方式也很简单,多进几次样品,直到峰面积和保留时间稳定,再进行正式进样测定。
如果要加快平衡时间,把前面用来平衡的进样样品浓度加大,或者不等洗脱完成,连续进样多针。用待测物对新柱平衡,目的是将硅胶基质填料表---有非特---吸附的位点的吸附能力饱和掉。
2测定多肽,一般采用什么柱子?流动相是yi腈和水,还有微量的tfa。---是像类似三肽的短肽,应该怎么选择柱子?
答:分子量不高的多肽一般选用常规c18柱就能测定,也有用离子交换柱、水性c18柱和hilic亲水作用柱的。
lux (手性色谱柱)
完整的手性分离方案
从分析到制备级别,简化手性分离,均是明智的投入!
lux手性柱和填料通过以下三种方法简化分离过程:
?---和传统的固定相相结合,增加手性筛选的成功率
?完全兼容于正相体系、极性有机相体系、超临界流体
?色谱及反相体系的方法-无需换柱!
使用lux?筛选工具包
可以分离92%*的对映体
现有5种---的固定相可选择!
1.amylose-2:---的---固定相扩大了对映体选择性范围;
2.cellulose-2:新型---固定相提高您手性筛选的成功率;
广州联方实验器材有限公司主营:液相色谱柱,kinetex色谱柱,gemini色谱柱,synergi色谱柱,luna色谱柱等等。我们不断追求,通过自身的不断完善,可以为您提供实验室和生产需要的玻璃耗材、标准物质、实验器材、色谱耗材和生物耗材,是quan面的实验室一体化采购平台。我们本着严谨、务实、---的创业精神,为您提供价格优惠、---的产品。我们有及时的送货服务,gemini色谱柱多少钱,准确而快捷地满足您的需要。
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色谱柱: gemini 3 μm c18
规格: 100 x 4.6mm
货号: 00d-4439-e0
流动相: a:0.1% ---的水溶液
b:jia醇
流速: 0.6ml/min
温度: 22 °c
检测: 电喷雾质谱 (esms) (22 °c)
检测器: sciex api 4000 系统
样品: 1. 烟---
2. ---
tmp 和硫胺
色谱柱: gemini 3 μm nx-c18
规格: 100 x 3.0mm
货号: 00d-4453-y0
流动相: a:含 10% jia醇的 25mm na2
hpo4
(ph 7.0)
b:含 70% jia醇的 25mm na2
hpo4
(ph 7.0)
流速: 0.75ml/min
检测: 荧光(激发:375 nm,发射:435 nm)(室温)
温度: 22 °c
样品: 1. tmp
2. 硫胺
蛋白质型:
蛋白质型手性色谱柱属于第5种类型。分离依赖于疏水相互作用和极性相互作用。已经有多种蛋白质用于此类手性色谱柱。目前使用较多的是α-酸性糖蛋白(α-acid glycoprotein,agp),人xue清白蛋白(human serum albumin,hsa),牛xue清白蛋白(bovine serum albumin,gemini色谱柱品牌,bsa)和卵类粘蛋白(ovomucoid,ov)。
α-酸性糖蛋白分子由181个---酸残基和40个唾液酸(sialic acid)残基构成。α-酸性糖蛋白分子偏酸性,等电点为2.7。含有两个二硫键,性质很稳定。α-酸性糖蛋白分子可以共价键合到硅胶上,制成手性色谱柱,梅州gemini色谱柱,可以分离许多化合物。
α-酸性糖蛋白手性色谱柱使用的流动相通常为ph 4-7的磷酸盐缓冲液和很小比例的有机相。有机相shou选异bing醇,如达不到分离要求,可以尝试yi腈,---,jia醇或---fu喃。有机相的改变导致蛋白结构发生暂时的改变。色谱柱的负载量---,典型的负载量为0.02mg/ml的浓度样品,进样20μl。ph 的改变---性选择性起关键作用,尤其是胺类化合物。ph降低导致蛋白质负电荷的降低,引起胺类化合物保留时间减小,然而这意味着可以减小有机相比例,使选择性增加,峰形---。
通过调节有机相比例仍无法达到分离效果时,有时需用电荷调节剂。但这可能引起蛋白结构的yong久改变,这些电荷调节剂包括---、辛酸、癸酸和二jia基辛胺。有时也用到1,2 亚二醇,1,2---和---。温度对分离也有影响,温度增加保留时间,减小分离因子。
人xue清白蛋白(hsa)分子量为69,000,等电点为4.8。蛋白中认为存在两个结合位点:华法令-氮杂普鲁帕宗(warfarin-azapropazone)结合位点。流动相中加入辛酸,采用人xue清白蛋白手性色谱柱可以有效分离benzodiazapine。warfarin也用人xue清白蛋白手性色谱柱得到了分离,流动相组成为:100mm磷酸缓冲液ph7:yi腈:异bing醇 = 84:10:6。
牛xue清白蛋白(bsa)为球型蛋白,分子量为66,000,等电点为4.7。此蛋白为一个单---酸链,通过17个二硫键形成9个双环。许多化合物通过牛xue清白蛋白手性色谱柱得到分离。牛xue清白蛋白不如α-酸性糖蛋白稳定,一些有ji溶剂(如yi腈、jia醇)可使蛋白变性,因此使用起来要---注意。
卵类粘蛋白由蛋清中提取,gemini色谱柱代理,分子量为55,000。它可分离大量的胺类和酸类化合物。
蛋白手性色谱柱的载样量均较小。影响了蛋白手性色谱柱在制备色谱中的应用。
蛋白手性色谱柱在所有手性色谱柱中是应用广的色谱柱,但并不是效果z好的色谱柱。
广州联方实验器材有限公司成立于2005年,位于广州番禺区,是集技术和销售于一体的企业。联方的创始人在美国纽约留学,归国创立了联方。中西结合的管理理念,自强不息、开拓进取、勤勉---,致力于把联方打造成一个---、一个z---一站式实验室采购平台,追求、追求服务、追求和---。科学化、精细化、化。 我们有及时的送货服务,准确而快捷地满足您的需要。公司主营:luna色谱柱,美国飞诺美色谱柱,phenomenex色谱柱,手性色谱柱,lux多糖类手性色谱柱等等
液相色谱柱的分类(按色谱固定相基质分)
1.硅胶基质:
1.1反相色谱柱:
反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对较弱的---团的键合相。反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水,缓冲液与jia醇,已腈等混合物。样品流---谱柱的顺序是极性较强组合z先被冲出,而极性弱的组份会在色谱柱上有---的保留。常用的反相填料有c18(ods)、c8(mos)、c4(b)、c6h5(phenyl)等。
1.2正相色谱:
正相色谱用的固定相通常为硅胶(silica),以及其他具有极性---团,如胺基团(nh2,aps)和qing基团(cn,cps)的键合相填料。由于硅胶表面的硅---(sioh)或其他团的极性较强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强弱的组份z先被冲洗---谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正yi烷(hexane),l仿(chloroform),---jia烷(methylene chloride)等。
1.3离子交换色谱柱:
以磺化交联强阴/阳离子键合硅胶色谱柱,常用规格:强阴离子色谱柱(sax),强阳离子交换色谱柱(scx)
2.聚合物基质:
聚合物调料多为聚ben乙烯-二乙烯基ben或聚jia基---酯等,其主要优点是在ph值为1~14均可使用。相对与硅胶基质的c18填料,这类填料具有---的疏水性;大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效较低。
所有聚合物基质在流动相发生变化时都会出现膨胀或收缩。用于hplc的高交联度聚合物填料,其膨胀和收缩要有---。溶剂或小分子容易渗入聚合物基质中,因为小分子在聚合物基质中的传质比在陶瓷性基质中慢,所以造成小分子在这种基质中柱效低。对于大分子像蛋白质或合成的高聚物,聚合物基质的效能比得上陶瓷性基质。因此,聚合物基质广泛用于分离大分子物质。
3.其他无机填料:
其它hplc的无机填料色谱柱也已经商品化。由于其特殊的性质,一般于特殊的用途。如石墨化碳也用于正逐渐成为反相色谱填料。这种填料的分离不同与硅胶基质烷ji键合相,石墨化碳的表面即是保留的基础,不再需其它的表面改性,该柱填料一般比烷ji键合硅胶或多孔聚合物填料的保留能力---,石墨化碳可用于分离某些几何导构体,又由于hplc流动相中不会被溶解,这类柱可在任何ph与温度下使用。氧化铝也可用于hplc,氧化铝微粒刚性强,可制成稳定的色谱柱柱床,其优点是可在ph---12的流动相中使用。但由于氧化铝与碱性化合物作用也很强,应用范围受到一定的---,所以未能广泛应用,新型氧化锆填料也可用于hplc,商品化的仅有聚合物涂层的多孔氧化锆微球色谱柱,应用ph范围1~14,温度可达100℃。由于氧化锆填料几年才开始研究,加之面临的实验难度,其重要用途与优势尚在进行中。
对尿液中的jia基ben丙胺和ben丙胺对映体进行快速、准确的手性分离
lux 3μm amp 是一款专为ben丙胺和取代ben丙胺(包括jia基ben丙胺)的手性分析而开发和测试的---液相色谱填料。一旦确定样品中存在ben丙胺或jia基ben丙胺,便可轻松实现对映体确认。
不受常见干扰物的影响
lux 3μm amp 的另一个---优势是,在分离ben丙胺和jia基ben丙胺对映体时不会受到下列常见的zhi疗和成分的影响。此外,luxamp 色谱柱的分离能力也有助于分离取代ben丙胺的对映体
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