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液相色谱柱的使用方法
关于色谱柱的安装、维护、保存以及由色谱柱导致的这样那样的色谱故障也是一门学问。gao效液相色谱柱的正确使用包含:加装保护柱,过滤流动相和样品,净化样品,避免过高的柱压,注意温度和酸碱度,正确及时的冲洗等。
1.加装保护柱
保护柱的作用是过滤掉来自流动相和样品的化学“拉圾”同时也可以有效除去流动相和样品中的不溶物。尽管现在的色谱仪在流动相吸入口、进样阀后部以及在色谱柱的两端都装有1、2μm等不同孔径的滤器,但滤器只能除去不溶性颗粒而不能除去化学污染,因此,加装保护柱是---的,---是在分析中药、zhong成药等复杂混合物和生物样品时更是保护分析柱必不可少的措施。
保护柱填料应与分析柱一致,粒径可较分析柱大。保护柱属消耗品,经过一定次数的样品分析(50~100次)后,出现柱压---升高或峰形变坏或基线漂移时,应考虑更换保护柱。
2.过滤流动相和样品
流动相通常由水或缓冲溶液与有ji溶剂混合而成,原则上,所有经过色谱柱的流动相均应过滤,但在实际操作上应视具体情况而有所区别:当有ji溶剂用色谱纯级,水用石英亚沸水或其它超纯水时,在能---水和有ji溶剂的且没有受到污染时,过滤并无更多实际意义。
当流动相中含有缓冲盐时,则过滤是---的,如前所述,当缓冲溶液放置一段时间(视环境温度不同而异,夏季一般不超过48 h,冬季一般不超过一周)后,在使用前还应重新过滤。
所配制的样品试液在注入流路系统前均要经0. 45μm ( 0. 22μm则---)孔径滤膜过滤。要注意区分水系和油系,二者不可混用,以防止滤膜溶解而造成污染。
装流动相的容器和色谱系统中的在线滤器要定期清洗和更换,以避免滤器因过载而起不到过滤作用。
3.净化样品
当样品中含有对色谱柱有损害的化学成分,如产生yong久性吸附的蛋白质、糖等有机分子和强吸附性物质,以及可能对柱填料产生破坏作用的基团离子。在进样前应尽可能对样品进行分离提纯以除去多余杂质组分。
4.避免过高柱压
虽然gao效液相色谱柱---受的压力可达6000 p si (磅/平方英寸) ,但过高及过大的压力变化均会缩短色谱柱的寿命,手性色谱柱品牌,避免的方法是
(1)柱压过高时,尽可能采用较小的流速,以不超过柱z大允许压力的一半为宜。
( 2)当流速较大时,应采取流速梯度的办法使流速分步---。
(3)使用手动进样阀时,进样阀的切换要尽可能的快。否则超过20%的压力冲击会很快使柱报废。当使用多柱联用时,柱切换要避免在高压下进行。
5.注意温度和酸碱度
一般以硅胶为基质的色谱柱z高使用温度不超过60℃,以低于40℃为宜,---是在流动相ph接近使用限度时,更应降低使用温度。
温度过高会加快键合相的水解和硅胶的溶解,从而使填料性质改变,柱床塌陷,降低柱效,改变峰形。
正确及时的冲洗
开始试验前,应了解柱中当前是何种溶剂。对于新色谱柱,如无特殊说明均为评价报告中所用流动相。柱中当前溶剂一定要与分析样品所用流动相互溶,如不能混溶,要用与二者均能相互混溶的第三种溶剂过渡。
充分发挥 uhplc 系统的性能
与市面上传统的亚 2 μm 级色谱柱相比,kinetex 1.3 和1.7 μm 核-壳色谱柱具有更高的柱效,可以实现---的色谱分离度、更高的峰容量和的灵敏度,让您可以从每
次 uhplc 分析中获得尽可能多的信息。
保护色谱柱而性能不下降
将污染物和微粒捕集在 securityguard? ultra 保护柱系统中。
hplc 和 uhplc 的升级
在小流量 hplc 或 uhplc 系统上,kinetex 2.6 μm 色谱柱的表现与全多孔亚 2 μm 级色谱柱相当,柱效是 5 μm 填料的 3 倍、3 μm 全多孔填料的 2 倍。使用更短的 kinetex色谱柱---提升现有方法的生产率和性能,同时减少溶剂消耗!
广州联方实验器材有限公司成立于2005年,位于广州番禺区,是集技术和销售于一体的企业。联方的创始人在美国纽约留学,归国创立了联方。公司主营:液相色谱柱,kinetex色谱柱,gemini色谱柱,synergi色谱柱,luna色谱柱等等。我们的服务范围:1、 亚速旺广州代理。2、 美国精骐有限公司广州一级代理。3、 丹麦capp、波兰radwag合作伙伴。4、 博纳艾杰尔、美国飞诺美phenomenex广东代理。5、 代理环凯、bd、梅里埃等微生物试剂。6、 提供国产和进口的玻璃、色谱耗材,3m、杜邦等防护产品。7、 代理中检所、计量院、usp、trc、dr、es、bepure、first standard。8、 定制各种实验分析检测玻璃装置,定制各种实验异形装置。
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c18 极性嵌入式
均衡的极性与非极性性能
嵌入式极性基团
使 c18 固定相同时具有极性
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tms 封尾
---色谱峰尖
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c12 tms 封尾
适用于中性 ph 下分析碱性化合物
高密度配体和大量的封尾可确
保尖锐峰型
配位交换型:
手性配位交换色谱(chiral ligandexchange chromatography,clec)davankov发明,是通过形成光学活性的金属络合物而达到手性分离,属于irving wainer分类中的第4类手性固定相,主要用于分离---酸类。
由于此类固定相是由手性---酸—铜离子络合物键合到硅胶或聚合物上形成,因此流动相中必须含有铜离子以---手性固定相上的铜离子不至流失。其它的过渡金属元素也已用于手性配位交换色谱,但铜离子应用广。形成络合物的过程十分缓慢,因此有时需提高柱温,手性色谱柱厂家,z佳温度约50℃。手性配位交换色谱仅对α- ---酸和其类似物有效。β- ---酸很难用手性配位交换色谱得以分离。手性配位交换色谱可用于制备,由于流动相中存在铜离子,虽然铜离子能用离子交换柱除去,但增加了样品处理的困难。
广州联方实验器材有限公司成立于2005年,位于广州番禺区,是集技术和销售于一体的企业。联方的创始人在美国纽约留学,归国创立了联方。中西结合的管理理念,自强不息、开拓进取、勤勉---,致力于把联方打造成一个---、一个z---一站式实验室采购平台,追求、追求服务、追求和---。科学化、精细化、化。
液相色谱柱使用问题解析
1对于一根常用的c18柱,拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护?为什么要这样做?
答:新柱活化,实际上是一个平衡的过程,汕尾手性色谱柱,除了用流动相平衡外,有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡,---是测定分子量比较高的多肽,尤其重要。因为分子量高的物质分子,扩散速度慢,平衡所需时间也相应较长。具体平衡方式也很简单,多进几次样品,直到峰面积和保留时间稳定,再进行正式进样测定。
如果要加快平衡时间,把前面用来平衡的进样样品浓度加大,手性色谱柱价格,或者不等洗脱完成,连续进样多针。用待测物对新柱平衡,目的是将硅胶基质填料表---有非特---吸附的位点的吸附能力饱和掉。
2测定多肽,一般采用什么柱子?流动相是yi腈和水,还有微量的tfa。---是像类似三肽的短肽,应该怎么选择柱子?
答:分子量不高的多肽一般选用常规c18柱就能测定,也有用离子交换柱、水性c18柱和hilic亲水作用柱的。
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lux手性柱和填料通过以下三种方法简化分离过程:
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可以分离92%*的对映体
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